IVF-ET周期中胚胎污染的实验室与临床结局分析

杜凤娇; 李瑞岐; 朱玉琴; 欧阳能勇; 区颂邦; 王文军

doi:10.13471/j.cnki.j.sun.yat-sen.univ(med.sci).2021.0114

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IVF-ET周期中胚胎污染的实验室与临床结局分析

临床研究 | 更新时间：2024-02-19

- IVF-ET周期中胚胎污染的实验室与临床结局分析
- Analysis on In Vitro Culture and Clinical Outcomes of Embryo Contamination During IVF-ET Cycles
- 中山大学学报（医学科学版） 2021年42卷第3期页码：432-440
- 作者机构：
  
  中山大学孙逸仙纪念医院生殖中心，广东广州 510120
- 作者简介：
  
  杜凤娇，硕士，技师，研究方向：人类辅助生殖技术，E-mail: fengjiaodu@163.com
- 基金信息：
  
  广东省自然科学基金(2018A030313911)
- DOI：10.13471/j.cnki.j.sun.yat-sen.univ(med.sci).2021.0114
  中图分类号： R71
- 收稿：2021-01-26，
  
  纸质出版：2021-05-20
- 稿件说明：
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杜凤娇,李瑞岐,朱玉琴等.IVF-ET周期中胚胎污染的实验室与临床结局分析[J].中山大学学报（医学科学版）,2021,42(03):432-440.

DU Feng-jiao,LI Rui-qi,ZHU Yu-qin,et al.Analysis on In Vitro Culture and Clinical Outcomes of Embryo Contamination During IVF-ET Cycles[J].Journal of Sun Yat-sen University(Medical Sciences),2021,42(03):432-440.
杜凤娇,李瑞岐,朱玉琴等.IVF-ET周期中胚胎污染的实验室与临床结局分析[J].中山大学学报（医学科学版）,2021,42(03):432-440. DOI： 10.13471/j.cnki.j.sun.yat-sen.univ(med.sci).2021.0114.

DU Feng-jiao,LI Rui-qi,ZHU Yu-qin,et al.Analysis on In Vitro Culture and Clinical Outcomes of Embryo Contamination During IVF-ET Cycles[J].Journal of Sun Yat-sen University(Medical Sciences),2021,42(03):432-440. DOI： 10.13471/j.cnki.j.sun.yat-sen.univ(med.sci).2021.0114.

摘要

目的

探讨体外受精-胚胎移植（IVF-ET）周期中体外培养的胚胎发生污染的情况及其实验室培养和临床结局。

方法

回顾性分析2010年1月至2020年12月中山大学孙逸仙纪念医院生殖中心IVF-ET周期中70例胚胎污染的相关资料，比较不同授精方式的污染发生率、体外培养第1~3天（D1-D3）的污染发现率、以及卵泡液、精液、培养液3种标本的污染发生率，统计污染的微生物类型，比较全污染组（42例）和部分污染组（28例）的实验室培养及临床结局相关参数。

结果

在29 583个周期中共出现70例胚胎污染（0.24%），所有污染均为体外受精（IVF）来源的胚胎而非卵胞浆内单精子注射（ICSI）来源的胚胎；在体外培养不同天数中，D2污染发现率最高（54.3%），其次是D1（32.9%）和D3（12.9%）；与卵泡液相比，精液是导致D1-D3污染发现的主要原因；卵泡液的主要污染源是粪肠球菌（18.0%），精液和培养液的主要污染源是大肠杆菌（59.6%， 66.7%），同时有5例污染周期的培养液中出现与卵泡液、精液均不一致的细菌类型；与全污染组相比，部分污染组的无可用胚胎周期率显著性降低（6/28

vs.

34/42， 21.4%

. 81.0%，

0.001），囊胚形成周期率有升高趋势（5/12

vs.

2/7， 41.2%

vs.

28.6%，

= 0.656），同时，部分污染组新鲜周期与解冻周期移植后的临床妊娠例数、活产例数均高于全污染组。

结论

ICSI受精方式可有效避免胚胎污染发生；胚胎污染主要在体外培养的第2天发现，污染主要来源是精液携带的大肠杆菌；当只有部分胚胎发生污染时，仍可获得较好的实验室和临床结局。

Abstract

Objective

To explore the occurrence， in vitro culture effect and clinical outcomes of embryo contamination during in vitro fertilization and embryo transfer （IVF-ET） cycles.

Methods

A retrospective analysis was made on the embryo contamination cases during IVF-ET treatment at Reproductive Medicine Centre， Department of Obstetrics and Gynecology， Sun Yat-sen Memorial Hospital， Sun Yat-sen University from January 2010 to December 2020. We compared the contamination of 4 different insemination methods， contamination on 3 different in vitro culture days （D1， D2， D3） and contamination of 3 different samples （follicular fluid， semen and culture medium）. The source of contamination and types of microbes were identified. We also compared in vitro culture and clinical outcomes between two groups （42 cases of all embryos contaminated and 28 cases of partial embryos contaminated）.

Results

Among the 29 583 cycles examined， 70 cycles had microbial contamination （0.24%）， and all contaminated embryos were from in vitro fertilization （IVF） source rather than intracytoplasmic sperm injection （ICSI） source. The contamination rate on D2 was the highest （54.3%）， followed by those on D1 （32.9%） and D3 （12.9%）. Compared with follicular fluid， semen is the most common source of contamination from D1-D3. The most common contaminants identified was

Enterococcus faecalis

in follicular fluid （18.0%）， while it was

Escherichia coli

in semen （59.6%） and culture medium （66.7%）. Moreover， the types of bacteria in culture medium were not consistent with those in follicular fluid and semen in 5 cases of microbial contamination. Compared with the Total contaminated group， the Partial contaminated group showed a significant decrease in No available embryo rates （6/28

. 34/42， 21.4%

. 81.0%，

0.001） and a rising trend in formation of blastocyst rates （5/12

. 2/7， 41.2%

. 28.6%，

=0.656）， meanwhile， the clinical pregnancy cases and live births cases after transplantation of fresh and frozen-thawed cycles in Partial contaminated group were higher than those in the Total contaminated group.

Conclusion

ICSI can effectively reduce embryo contamination. Embryo contamination mainly occurred on D2 in vitro culture and the most common contamination source is

Escherichia coli

in semen. Partial embryo contamination may still result in good in vitro culture effect and clinical outcomes during IVF-ET cycles.

关键词

Keywords

references

Esteves SC ， Bento FC . Implementation of air quality control in reproductive laboratories in full compliance with the Brazilian cells and germinative tissue directive ［J］. Reprod Biomed Online ， 2013 ， 26 （ 1 ）： 9 - 21 .

Krissi H ， Orvieto R ， Ashkenazi J ， et al . Effect of contaminated preprocessed semen on fertilization rate and embryo quality in assisted reproductive techniques ［J］. Gynecol Endocrinol ， 2004 ， 18 （ 2 ）： 63 - 67 .

Borges ED ， Berteli TS ， Reis TF ， et al . Microbial contamination in assisted reproductive technology： source， prevalence， and cost ［J］. J Assist Reprod Genet ， 2020 ， 37 （ 1 ）： 53 - 61 .

聂睿，靳镭，胡娟，等 . 体外受精中胚胎污染38例临床分析［J］. 中国实用妇科与产科杂志， 2014 ， 30 （ 11 ）： 902 - 904 .

Nie R ， Jin L ， Hu J ， et al . Clinical analysis of 38 cases of microbial contamination of embryo cultures during in vitro fertilization ［J］. Chine J Pract Gynecol Obstet ， 2014 ， 30 （ 11 ）： 902 - 904 .

Kastrop PM ， De Graaf-Miltenburg LA ， Gutknecht DR ， et al . Microbial contamination of embryo cultures in an ART laboratory： sources and management ［J］. Hum Reprod ， 2007 ， 22 （ 8 ）： 2243 - 2248 .

Ben-Chetrit A ， Shen O ， Haran E ， et al . Transfer of embryos from yeast-colonized dishes ［J］. Fertil Steril ， 1996 ， 66 （ 2 ）： 335 - 337 .

Cottell E ， Mcmorrow J ， Lennon B ， et al . Microbial contamination in an in vitro fertilization-embryo transfer system ［J］. Fertil Steril ， 1996 ， 66 （ 5 ）： 776 - 780 .

Bureau M ， Dea S ， Sirard MA . Evaluation of virus decontamination techniques for porcine embryos produced in vitro ［J］. Theriogenology ， 2005 ， 63 （ 9 ）： 2343 - 2355 .

Poletto KQ ， De Lima YaR ， Approbato MS . Effect of the air filtration system replacement on embryo quality in the assisted reproduction laboratory ［J］. Rev Bras Ginecol Obstet ， 2018 ， 40 （ 10 ）： 625 - 630 .

倪语星 . 临床微生物学检验［M］. 北京：人民卫生出版社， 2012 ： 50 - 56 .

Ni YX . Clinical microbiological examination ［M］. People's Medical Publishing House ， 2012 ： 50 - 56 .

朱桂金，魏玉兰，胡娟，等 . 体外受精过程中胚胎污染及其来源的探讨［J］. 中华妇产科杂志， 2004 ， 39 （ 6 ）： 382 - 384 .

Zhu GJ ， Wei YL ， Hu J ， et al . Microorgani contamination in in vitro fertilization-embryo transfer system and their sources ［J］. Chin J Obstet Gynecol ， 2004 ， 39 （ 6 ）： 382 - 384 .

公方强，牛向丽，唐秀法，等 . 体外受精胚胎污染临床结局分析［J］. 中国妇幼保健， 2017 ， 32 （ 4 ）： 798 - 800 .

Gong FQ ， Niu XL ， Tang XF ， et al . Analysis on clinical outcomes of embryo contamination during in vitro fertilization ［J］. Maternal and Child Health Care of China ， 2017 ， 32 （ 4 ）： 798 - 800 .

Kiessling AA ， Desmarais BM ， Yin HZ ， et al . Detection and identification of bacterial DNA in semen ［J］. Fertil Steril ， 2008 ， 90 （ 5 ）： 1744 - 1756 .

Palini S ， Primiterra M ， Stefani SD ， et al . A new micro swim-up procedure for sperm preparation in ICSI treatments： preliminary microbiological testing ［J］. JBRA Assist Reprod ， 2016 ， 20 （ 3 ）： 94 - 98 .

Willén M ， Hoist E ， Myhre EB ， et al . The bacterial flora of the genitourinary tract in healthy fertile men ［J］. Scand J Urol Nephrol ， 1996 ， 30 （ 5 ）： 387 - 393 .

Cottell E ， Harrison RF ， Mccaffrey M ， et al . Are seminal fluid microorganisms of significance or merely contaminants？［J］. Fertil Steril ， 2000 ， 74 （ 3 ）： 465 - 470 .

Domes T ， Lo KC ， Grober ED ， et al . The incidence and effect of bacteriospermia and elevated seminal leukocytes on semen parameters ［J］. Fertil Steril ， 2012 ， 97 （ 5 ）： 1050 - 1055 .

Ricci S ， Giorgi SD ， Lazzeri E ， et al . Impact of asymptomatic genital tract infections on in vitro Fertilization （IVF） outcome ［J］. PLoS ONE ， 2018 ， 13 （ 11 ）： e0207684- .

Moretti E ， Baccetti B ， Capitani S ， et al . Necrosis in human spermatozoa. II. Ultrastructural features and FISH study in semen from patients with recovered uro-genital infections ［J］. J Submicrosc Cytol Pathol ， 2005 ， 37 （ 1 ）： 93 - 98 .

Jedrzejczak P ， Fraczek M ， Szumaa‐Kakol A ， et al . Consequences of semen inflammation and lipid peroxidation on fertilization capacity of spermatozoa in in vitro conditions ［J］. Int J Androl ， 2005 ， 28 （ 5 ）： 275 - 283 .

Jue JS ， Ramasamy R . Significance of positive semen culture in relation to male infertility and the assisted reproductive technology process ［J］. Transl Androl Urol ， 2017 ， 6 （ 5 ）： 916 - 922 .

李菁，朱伟杰，张文红 . 人类体外受精培养液内毒素水平的评价［J］. 生殖与避孕， 2006 ， 26 （ 6 ）： 328 - 330 .

Li J ， Zhu WJ ， Zhang WH . Evaluation of endotoxin in culture medium for human in vitro fertilization ［J］. Reproduction and Contraception ， 2006 ， 26 （ 6 ）： 328 - 330 .

Selman H ， Mariani M ， Barnocchi N ， et al . Examination of bacterial contamination at the time of embryo transfer， and its impact on the IVF/pregnancy outcome ［J］. J Assist Reprod Genet ， 2007 ， 24 （ 9 ）： 395 - 399 .

García-Velasco JA ， Menabrito M ， Catalán IB . What fertility specialists should know about the vaginal microbiome： a review ［J］. Reprod Biomed Online ， 2017 ， 35 （ 1 ）： 103 - 112 .

Bracewell-Milnes T ， Saso S ， Nikolaou D ， et al . Investigating the effect of an abnormal cervico-vaginal and endometrial microbiome on assisted reproductive technologies： A systematic review ［J］. Am J Reprod Immunol 2018 ， 80 （ 5 ）： e13037 .

Pelzer ES ， Allan JA ， Waterhouse MA ， et al . Microorganisms within human follicular fluid： Effects on IVF ［J］. PloS One ， 2013 ， 8 （ 3 ）： e59062 .

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