糖尿病合并脓毒症小鼠肠损伤特点
Characteristics of Intestinal Injury in Diabetic Mice with Sepsis
- 中山大学学报（医学科学版） 2021年42卷第4期 页码：513-520
- 作者机构：
中山大学附属第七医院麻醉科，广东 深圳 518107
- 作者简介：
庞昌季，硕士生，研究方向：围术期器官功能损伤，E-mail：1071286543@qq.com
- 基金信息：国家自然科学基金(82070072;81873644);广东省科技计划项目(2017A020215074)
DOI：10.13471/j.cnki.j.sun.yat-sen.univ(med.sci).2021.0405
中图分类号： R587.1纸质出版日期：2021-07-20，
收稿日期：2021-03-17，
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庞昌季,谭芳,郑磊等.糖尿病合并脓毒症小鼠肠损伤特点[J].中山大学学报（医学科学版）,2021,42(04):513-520.
PANG Chang-ji,TAN Fang,ZHENG Lei,et al.Characteristics of Intestinal Injury in Diabetic Mice with Sepsis[J].Journal of Sun Yat-sen University(Medical Sciences),2021,42(04):513-520.
庞昌季,谭芳,郑磊等.糖尿病合并脓毒症小鼠肠损伤特点[J].中山大学学报（医学科学版）,2021,42(04):513-520. DOI： 10.13471/j.cnki.j.sun.yat-sen.univ(med.sci).2021.0405.
PANG Chang-ji,TAN Fang,ZHENG Lei,et al.Characteristics of Intestinal Injury in Diabetic Mice with Sepsis[J].Journal of Sun Yat-sen University(Medical Sciences),2021,42(04):513-520. DOI： 10.13471/j.cnki.j.sun.yat-sen.univ(med.sci).2021.0405.
摘要
目的
2
观察糖尿病合并脓毒症小鼠肠损伤特点，并初步探讨M1巨噬细胞在糖尿病合并脓毒症肠损伤中的作用。
方法
2
BKS-DB（
Lepr ko/ko
）和BKS-DB（
Lepr wt/wt
）雄性小鼠随机分为非糖尿病鼠假手术组（NDMS组）、非糖尿病鼠脓毒症模型组（NDMCLP组）、糖尿病鼠假手术组（DMS组）、糖尿病鼠脓毒症模型组（DMCLP组）4组，每组6只；细胞实验分为对照组（Sham组）、高糖组（HG组）、脂多糖组（LPS组）、高糖+脂多糖组（HG+LPS组）4组。采用盲肠结扎穿孔术（CLP）构建糖尿病合并脓毒症小鼠模型，观察小鼠肠组织病理损伤情况、肠组织 Occludin 和ZO-1蛋白表达量变化、巨噬细胞极化特征及炎症因子基因表达情况；采用高糖与LPS共刺激巨噬细胞，流式细胞学技术检测体外巨噬细胞极化变化，qPCR技术检测炎症因子基因表达量。
结果
2
CLP后12 h，DMCLP组小鼠肠组织病理损伤Chiu's评分显著升高，肠组织Occludin、ZO-1蛋白表达量降低（
P
＜0.05）；DMCLP组小鼠肠组织巨噬细胞数量明显增加，M1标志物iNOS、CRR7 mRNA表达显著升高，炎症因子TNF-α、IL-1β和IL-6 mRNA表达明显上升（
P
＜0.05）。体外细胞实验中，HG+LPS组M1巨噬细胞标志物CD86及炎症因子TNF-α、IL-1β和IL-6 mRNA表达显著升高（
P
＜0.05）。
结论
2
糖尿病合并脓毒症小鼠肠损伤较非糖尿病脓毒症小鼠更为严重，可能与高糖时巨噬细胞更易在LPS的作用下向M1极化有关，促进炎症因子表达有关。
Abstract
Objective
2
The present study was designed to explore the role of high glucose and macrophage polarization and their potential relation to septic intestinal injury.
Methods
2
BKS-DB （
Lepr ko/ko
） and BKS-DB （
Lepr wt/wt
） male mice were randomly divided into 4 groups （
n
=6）， which include non-diabetic mice sham group （NDMS group）， non-diabetic mice CLP group （NDMCLP group）， diabetic mice sham group （DMS group）， diabetic mice CLP group （DMCLP group）. The cell experiment was divided into four groups： control group （Sham group）， high glucose group （HG group）， lipopolysaccharide group （LPS group）， high glucose and lipopolysaccharide group （HG+LPS group）. Animal and cell models were respectively established by cecal ligation and puncture （CLP） and co-stimulation of high glucose and LPS. The pathological injury and Occludin and ZO-1 protein expression of intestinal tissue were detected. The distribution and polarization characteristics of macrophages were detected by immunofluorescence， real-time quantitative PCR （RT-PCR） and Western blot.
Results
2
Twelve hours after CLP， the intestinal pathological scores significantly increased in the DMCLP group （
P
<
0.05）. The results of western blot and RT-PCR showed the expressions of intestinal Occludin and ZO-1 protein were decreased in the DMCLP group， while the expression of inflammatory cytokines TNF-α， IL-1β and IL-6 mRNA was increased significantly （
P
<
0.05）. The results of immunofluorescence and RT-PCR showed the number of macrophages in the intestinal tissue of mice in the DMCLP group increased significantly， and the expression of M1 markers iNOS and CRR7 mRNA increased significantly （
P
<
0.05）. In further cell experiment， the expressions of M1 macrophages marker CD86 and inflammatory cytokine TNF-α， IL-1β and IL-6 mRNA were significantly increased in the HG+LPS group.
Conclusion
2
High glucose might aggravate intestinal injury by promoting LPS-induced macrophage polarization to M1 type.
关键词
糖尿病脓毒症肠损伤巨噬细胞极化
Keywords
diabetessepsisintestinal injurymacrophage polarization
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