CircOMA1调控多巴胺受体促进泌乳素瘤耐药性

张译尹; 吴娜; 李雪莉; 胡斌; 吴欣仪; 朱永红

doi:10.13471/j.cnki.j.sun.yat-sen.univ(med.sci).2022.0306

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CircOMA1调控多巴胺受体促进泌乳素瘤耐药性

基础研究 | 更新时间：2024-02-19

- CircOMA1调控多巴胺受体促进泌乳素瘤耐药性
- CircOMA1 Promotes Resistance in Prolactinoma by Regulating Dopamine Receptors
- 中山大学学报（医学科学版） 2022年43卷第3期页码：381-391
- 作者机构：
  
  1.中山大学中山医学院，广东广州 510080
  2.中山大学附属第一医院神经外科，广东广州 510080
- 作者简介：
  
  张译尹，硕士生，研究方向：垂体腺瘤发生机制，E-mail：958069148@qq.com
  ，共同第一作者；
- 基金信息：
  
  广东省自然科学基金(2022A1515011265;2020A1515010297);中山大学临床医学研究5010计划项目(2016008)
- DOI：10.13471/j.cnki.j.sun.yat-sen.univ(med.sci).2022.0306
  中图分类号： R363.2
- 收稿：2022-03-23，
  
  纸质出版：2022-05-20
- 稿件说明：
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张译尹,吴娜,李雪莉等.CircOMA1调控多巴胺受体促进泌乳素瘤耐药性[J].中山大学学报（医学科学版）,2022,43(03):381-391.

ZHANG Yi-yin,WU Na,LI Xue-li,et al.CircOMA1 Promotes Resistance in Prolactinoma by Regulating Dopamine Receptors[J].Journal of Sun Yat-sen University(Medical Sciences),2022,43(03):381-391.
张译尹,吴娜,李雪莉等.CircOMA1调控多巴胺受体促进泌乳素瘤耐药性[J].中山大学学报（医学科学版）,2022,43(03):381-391. DOI： 10.13471/j.cnki.j.sun.yat-sen.univ(med.sci).2022.0306.

ZHANG Yi-yin,WU Na,LI Xue-li,et al.CircOMA1 Promotes Resistance in Prolactinoma by Regulating Dopamine Receptors[J].Journal of Sun Yat-sen University(Medical Sciences),2022,43(03):381-391. DOI： 10.13471/j.cnki.j.sun.yat-sen.univ(med.sci).2022.0306.

摘要

目的

探究环状RNA hsa_circ_0002316（circOMA1）是否参与泌乳素瘤耐药调控及其作用机制是什么。

方法

通过RT-qPCR检测临床泌乳素瘤标本中circOMA1表达情况（5例敏感泌乳素瘤标本和12例耐药泌乳素瘤标本）。通过慢病毒载体构建稳定表达外源性circOMA1 MMQ细胞系模型进行体外实验，分为MMQ NC组及MMQ OMA1组。通过构建裸鼠皮下肿瘤模型进行体内实验，分为MMQ NC+卡麦角林（CAB）组、MMQ NC+溴隐亭（BRC）组、MMQ OMA1+CAB组、MMQ OMA1+BRC组。通过CCK8、Western blot、ELISA等表型实验检测circOMA1对耐药机制中的细胞增殖和泌乳素（PRL）分泌两个方面的影响。通过Western blot、ELISA、免疫组化等实验检测circOMA1对多巴胺受体表达的影响。通过TargetScan、CircInteractome等软件分析预测、 microRNA-145-5p（miR-145-5p） minic补救实验探究circOMA1调控多巴胺受体机制。

结果

RT-qPCR结果显示多巴胺受体激动剂（DAs）耐药泌乳素瘤中circOMA1表达升高（

＜0.01）。在细胞实验及裸鼠皮下肿瘤实验中，与MMQ NC组相比，MMQ OMA1组DAs敏感性降低，细胞增殖水平和泌乳素分泌水平升高（

＜0.05）。Western blot和免疫组化结果显示，MMQ OMA1组多巴胺2型受体（DRD2）表达下调，多巴胺5型受体（DRD5）表达上调，环3’，5’-单磷酸腺苷（cAMP）水平上调（

＜0.05）。此外，在MMQ OMA1组中miR-145-5p表达下调，kelch重复序列和BTB结构域蛋白7（KBTBD7）mRNA及蛋白表达水平上调（

＜0.05），然而MMQ OMA1组转染miR-145-5p minic后，KBTBD7表达下调，DRD2表达上调（

＜0.05），表明过表达miR-145-5p逆转了circOMA1对KBTBD7的促进作用。

结论

circOMA1通过miR-145-5p/KBTBD7轴下调DRD2表达，降低泌乳素瘤对DAs敏感性，并且调控多巴胺受体表达激活cAMP通路促进泌乳素合成释放，从而促进泌乳素瘤耐药性。

Abstract

Objective

To investigate whether hsa_circ_0002316 （circOMA1） is involved in drug resistance in prolactinoma and its mechanism.

Methods

RT-qPCR was used to dectect the expression of circOMA1 in clinical prolactinoma specimens including 5 dopamine receptor agonists （DAs）-sensitive prolactinomas and 12 DAs-resistant prolactinomas. MMQ cell lines with stable expression of exogenous circOMA1 were constructed by lentivirus vector infection for in vitro experiment， and were divided into MMQ NC group and MMQ OMA1 group. Xenograft tumor models in nude mice were established for in vivo experiment， and were divided into MMQ NC+cabergoline （CAB） group， MMQ NC+bromocriptine （BRC） group， MMQ OMA1+CAB group and MMQ OMA1+BRC group. CCK8， Western blot and ELISA were performed to detect the effects of circOMA1 on cell proliferation and secretion of prolactin （PRL） in drug resistance mechanism. Western blot， ELISA and immunohistochemistry were used to examine the effect of circOMA1 on dopamine receptor expression. The mechanism of circOMA1 regulating dopamine receptor was explored by TargetScan， CircInteractome and microRNA-145-5p （miR-145-5p） minic remediation experiment.

Results

RT-qPCR showed that circOMA1 expression was increased in DAs-resistant prolactinomas （

0.01）. Compared with MMQ NC group， MMQ OMA1 group had lower DAs sensitivity and increased cell proliferation and prolactin secretion （

0.05） in vivo and in vitro. Western blot and immunohistochemical analysis showed that in MMQ OMA1 group， the expression of dopamine receptor type 2 （DRD2） was down-regulated， and the expression of dopamine receptor type 5 （DRD5）， the cyclic 3 'and 5' -adenosine monophosphine （cAMP） was up-regulated （

0.05）. In MMQ OMA1 group， miR-145-5p expression was down-regulated， kelch repeat sequence and BTB domain-containing protein 7 （KBTBD7） mRNA and protein expression was up-regulated （

0.05）. After transfected with miR-145-5p minic， MMQ OMA1 group exhibited down-regulated KBTBD7 expression and up-regulated DRD2 expression （

0.05）， which indicated that overexpression of miR-145-5p reversed the promoting effect of circOMA1 on KBTBD7.

Conclusion

CircOMA1 down-regulated DRD2 expression through miR-145-5p/KBTBD7 pathway to reduce the sensitivity of prolactinoma to DAs， and regulated the expression of dopamine receptors to activate the cAMP pathway and promote the synthesis and release of prolactin， thus promoting the drug resistance in prolactinoma.

关键词

Keywords

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