三氧化二砷对T急淋白血病及DNA转甲基酶1的影响
Effect of Arsenic Trioxide on Acute T-Lymphocytic Leukemia and
DNA methyltransferase 1 - 中山大学学报（医学科学版） 2022年43卷第3期 页码：422-429
- 作者机构：
1.中山大学附属第一医院儿科，广东 广州 510080
2.中山大学中山医学院寄生虫学教研室//中山大学热带病防治研究教育部重点实验室，广东 广州 510080
- 作者简介：
苏嘉茵，硕士生，研究方向：儿童血液肿瘤，E-mail：sujy26@mail2.sysu.edu.cn
- 基金信息：广东省中医药局科研基金(20201056);广东省医学科学技术研究基金(20191118191022583)
DOI：10.13471/j.cnki.j.sun.yat-sen.univ(med.sci).2022.0310
中图分类号： R733.71收稿：2022-02-25，
纸质出版：2022-05-20
- 稿件说明：
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苏嘉茵,吴忠道,罗学群.三氧化二砷对T急淋白血病及DNA转甲基酶1的影响[J].中山大学学报（医学科学版）,2022,43(03):422-429.
SU Jia-yin,WU Zhong-dao,LUO Xue-qun.Effect of Arsenic Trioxide on Acute T-Lymphocytic Leukemia and DNA methyltransferase 1[J].Journal of Sun Yat-sen University(Medical Sciences),2022,43(03):422-429.
苏嘉茵,吴忠道,罗学群.三氧化二砷对T急淋白血病及DNA转甲基酶1的影响[J].中山大学学报（医学科学版）,2022,43(03):422-429. DOI： 10.13471/j.cnki.j.sun.yat-sen.univ(med.sci).2022.0310.
SU Jia-yin,WU Zhong-dao,LUO Xue-qun.Effect of Arsenic Trioxide on Acute T-Lymphocytic Leukemia and DNA methyltransferase 1[J].Journal of Sun Yat-sen University(Medical Sciences),2022,43(03):422-429. DOI： 10.13471/j.cnki.j.sun.yat-sen.univ(med.sci).2022.0310.
摘要
目的
2
本研究旨在探索三氧化二砷（ATO）对急性T淋巴细胞白血病（T-ALL）细胞中DNA转甲基酶1（
DNMT1
）表达的影响及其抗白血病作用机制。
方法
2
体外培养T-ALL细胞株（Jurkat、CCRF-CEM、Molt-4），依据不同ATO干预浓度，分为对照组（0 μmol/L）、低浓度组（3 μmol/L）、高浓度组（6 μmol/L），应用RT-qPCR和western blot研究 ATO（0、3、6 μmol/L）干预24 h后细胞内
DNMT1
和
cleaved-caspase-3
表达的变化；应用流式细胞术测定 T-ALL 细胞系（Jurkat、CCRF-CEM、MOLT-4）的细胞死亡率；在ATO的干预下，应用Z-DEVD-FMK后检测
DNMT1
和
cleaved-caspase-3
表达和细胞死亡率的变化；在ATO的干预下，过表达
DNMT1
检测T-ALL细胞死亡率的变化。
结果
2
随着ATO浓度的增加，T-ALL细胞
DNMT1
表达水平降低，
cleaved-caspase-3
蛋白表达水平增加，细胞死亡率增加，差异具有统计学意义（
P
<
0.05）；应用Z-DEVD-FMK后可特异性抑制
cleaved-caspase-3
，减弱ATO对
DNMT1
表达的抑制作用，降低细胞死亡率，差异具有统计学意义（
P
<
0.05）；在T-ALL细胞中过表达
DNMT1
可显著降低ATO处理后诱导的细胞死亡，差异具有统计学意义（
P
<
0.05）。
结论
2
在一定浓度范围内，ATO可通过激活
caspase-3
有效抑制
DNMT1
的表达从而诱导T-ALL细胞死亡，为未来ATO作为去甲基化药物应用于提高T-ALL的临床治疗提供了一定的理论依据。
Abstract
Objective
2
To explore the effect of arsenic trioxide （ATO） on the expression of DNA methyltransferase 1 （
DNMT1
） and its anti-leukemia mechanism in acute T-lymphocytic leukemia （T-ALL） cells.
Methods
2
T-ALL cell lines （Jurkat， CCRF-CEM， Molt-4） were cultured in vitro and divided into control （0 μmol/L）， low concentration （3 μmol/L） and high concentration （6 μmol/L） groups according to the dose of ATO， and the expression of
DNMT1
and
cleaved-caspase-3
were investigated by RT-qPCR and western blot after ATO treatment for 24 h （0， 3 and 6 μmol/L） intervention； Flow cytometry was applied to detect cell death in T-ALL cell lines （Jurkat， CCRF-CEM， MOLT-4）； The expression of
DNMT1
and
cleaved-caspase-3
and cell death were detected after applying ATO and Z-DEVD-FMK （
caspase-3
specific inhibitor）； T-ALL cell death was detected after overexpressing DNMT1 under ATO intervention.
Results
2
With the dose of ATO increasing， the expression level of
DNMT1
in T-ALL cells decreased， the expression level of
cleaved-caspase-3
protein increased， and the cell mortality increased （
P
<
0.05）； The application of Z-DEVD-FMK specifically inhibited
cleaved-caspase-3
， diminished the inhibitory effect of ATO on
DNMT1
expression， and decreased the cell mortality （
P
<
0.05）；Overexpression of DNMT1 in T-ALL cells significantly reduced cell death induced by ATO treatment （
P
<
0.05）.
Conclusion
2
Within a certain concentration range， ATO effectively down-regulates the expression of
DNMT1
via the activation of
caspase-3
in a dose-dependent manner， thus inducing cell death in T-ALL cells， which provides a theoretical basis for the future application of ATO as a demethylating drug to improve the clinical treatment of T-ALL.
关键词
Keywords
references
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