最新刊期
      2022 年 第 43 卷 3 期

        基础研究

      • 谭立人,肖颂华,雷鸣
        2022, 43(3): 331-343. DOI: 10.13471/j.cnki.j.sun.yat-sen.univ(med.sci).2022.0301
        摘要：目的观察小鼠软脑膜淋巴内皮细胞的空间时间分布及其对小鼠行为的影响。方法免疫荧光检测1周，2周，4周，10周，15周，15月龄野生型C57BL/6小鼠背侧，颞侧，腹侧，侧脑室旁软脑膜中Lyve-1+和CD68+细胞数量，并将15周龄野生型C57BL/6小鼠和APP/PS1转基因小鼠不同软脑膜区域中Lyve-1+和CD68+细胞数量进行比较。将26只2周龄C57BL小鼠随机进行如下分组：PBS注射组 （n=10）、anti-Lyve-1中和抗体注射组 （n=9）、SAR131675小分子抑制剂注射组 （n=7），3组注射剂量均为2 μL。注射后2周（即4周龄）对两组小鼠进行旷场实验，三箱社交实验，新物体识别实验。随后免疫荧光检测三组小鼠软脑膜淋巴内皮细胞的比例。结果软脑膜淋巴内皮细胞数量在不同区域分布的差异无统计学意义 （F=0.870 0， P=0.466 8， df=3）。小鼠软脑膜Lyve-1+淋巴管内皮细胞数量呈增龄性下降（F=17.30， P<0.000 1， df=5）。不同年龄小鼠背侧软脑膜Lyve-1+和CD68+细胞占Lyve-1+细胞比例差异无统计学意义（F=0.268 6， P=0.924 4， df=5）。15周龄APP/PS1转基因小鼠软脑膜Lyve-1+细胞比例小于同周龄野生型C57BL/6小鼠（t=6.381， P=0.007 8）。中和抗体注射组抑制剂组小鼠软脑膜Lyve-1+细胞占比均低于对照组，差异具有统计学意义 （均P<0.001）。旷场实验中，抑制剂注射组小鼠的探索运动能力下降，但对旷场中央区域的探索意愿增强；中和抗体注射组小鼠仅对旷场中央区域的探索意愿增强。三箱社交实验中，中和抗体注射小鼠未表现出社交行为减少和社交偏好。抑制剂注射组小鼠在接触频次表现出社交行为减少，但未表现出社交偏好，说明抑制剂注射小鼠存在社交行为的减少。新物体识别实验中，中和抗体注射小鼠在接触频次，时间与路程上与对照组相比没有变化；但小分子抑制剂注射小鼠在新物体识别实验中表现出短期记忆能力的下降。结论软脑膜淋巴内皮细胞的发育可能调控小鼠生命早期的行为功能，可能与其对脑脊液中大分子物质的吞噬有关。  
        关键词：软脑膜;淋巴内皮细胞;发育;吞噬;APP/PS1小鼠;行为学   
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        发布时间：2024-02-19
      • 胡瑞,周仪,李梅,王冠蕾
        2022, 43(3): 344-351. DOI: 10.13471/j.cnki.j.sun.yat-sen.univ(med.sci).2022.0302
        摘要：目的囊性纤维化跨膜转导调节因子（CFTR）氯通道参与血小板活化的调控。本研究探讨CFTR氯通道对脂多糖（LPS）引起的内毒素血症过程中血小板活化、血小板数目及血小板介导炎症因子生成的影响。方法应用8~12周龄CFTR全基因敲除（Cftr-/-）小鼠及野生型（Cftr+/+）小鼠，制备股静脉注射LPS诱导内毒素血症模型。分离小鼠外周血的血小板，采用免疫印迹法检测TLR4蛋白的表达，采用实时定量PCR法检测炎症因子IL-1β、IL-6、IL-10、TNF-α和CRP的表达。采用腺病毒介导的CFTR cDNA过表达（Ad-CFTR）和应用CFTR矫正剂VX-661处理人巨核细胞株MEG-01，检测CFTR对LPS引起的上述指标变化的影响。结果Cftr+/+小鼠静脉注射LPS后，外周血血小板TLR4和P-selectin表达增加、血小板数目减少、血小板表达促炎炎症因子mRNA水平升高，而CFTR全基因敲除加重之（P<0.05）。体外MEG-01人巨核细胞应用LPS刺激后，CFTR蛋白表达降低，TLR4蛋白表达升高，LPS上调IL-1β、CRP、TNF-α而下调IL-10表达（P<0.01）；Ad-CFTR或VX661可部分或全部逆转上述效应（P<0.01）。结论本研究揭示了CFTR氯通道可调控血小板活化及血小板TLR4介导的炎症因子生成。  
        关键词：CFTR;LPS;血小板;内毒素血症;炎症因子   
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        发布时间：2024-02-19
      • 王清波,唐姣玲,郭开华,徐杰
        2022, 43(3): 352-360. DOI: 10.13471/j.cnki.j.sun.yat-sen.univ(med.sci).2022.0303
        摘要：目的探讨表达M2型小胶质细胞标志物精氨酸酶1（Arginase1，Arg1）敲低对阿尔茨海默病模型小鼠（APP/PS1）认知功能的影响。方法采用Arginase1基因工程小鼠，分为C57BL/6对照组（WT）、Arginase1低表达组（Arg1+/-）、阿尔茨海默病小鼠模型组（APP/PS1）、Arginase1、APP/PS1转基因小鼠Arginase1低表达组（Arg1+/-；APP/PS1），旷场实验（OFT）、Morris水迷宫（MWM）实验分别测试小鼠自主活动和适应能力、学习记忆能力，硫磺素S染色法和免疫荧光染色法检测小鼠脑内β-淀粉样蛋白（Aβ）沉积；小鼠海马区域Arginase1，小胶质细胞特征性标志物离子钙接头蛋白分子1（Iba1）、跨膜蛋白119（Tmem119）及溶酶体蛋白（CD68）表达量；ELISA法检测海马和皮质组织Aβ1-40、Aβ1-42表达量，蛋白免疫印迹（Western blot）法检测淀粉样蛋白前体蛋白 （APP）、APP-β位点剪切酶（BACE）、脑啡肽酶（NEP）、白细胞介素-1β（IL-1β）表达量。结果OFT结果显示，与APP/PS1组比较Arg1+/-；APP/PS1组在中央格区域的持续时间和运动频率明显增高（P<0.001）；MWM实验结果显示，与APP/PS1组比较Arg1+/-；APP/PS1组小鼠逃避潜伏期明显减少（P<0.001）、目标象限停留时间和距离及穿越平台次数均明显增多（均P<0.05）；硫磺素S和免疫荧光染色法测定，与APP/PS1组比较Arg1+/-；APP/PS1组海马区域Aβ水平显著降低（P<0.001），与APP/PS1组比较Arg1+/-；APP/PS1组海马区域小胶质细胞表达CD68增多（P=0.039 2，P=0.000 3）；ELISA与Western blot结果显示，与APP/PS1组比较，Arg1+/-；APP/PS1组Aβ1-40、Aβ1-42、APP、IL-1β水平下降，NEP蛋白表达量增加（P<0.000 1），BACE蛋白表达量无明显差异（P=0.497 7）。结论在APP/PS1模型小鼠中，下调Arginase1可能促进脑内小胶质细胞激活，上调Aβ降解酶NEP水平，减少脑内Aβ沉积和神经炎症，从而提高AD模型小鼠空间学习能力。  
        关键词：精氨酸酶1;APP/PS1转基因小鼠;β-淀粉样蛋白   
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        发布时间：2024-02-19
      • 麦芷莹,陈淑娜,张幸鼎,赵文婧,郑永江
        2022, 43(3): 361-372. DOI: 10.13471/j.cnki.j.sun.yat-sen.univ(med.sci).2022.0304
        摘要：目的结合生物信息学途径和细胞分子实验，探讨E2F转录因子2（E2F2）对多发性骨髓瘤细胞粘附的影响。方法首先，利用临床样本和GEO数据库分析E2F2在骨髓瘤中的表达水平与患者的预后关系。其次，从敲低E2F2的骨髓瘤细胞系MM.1S的RNA-seq数据中筛选差异基因，并进行GO功能富集和KEGG信号通路分析，同时，利用string网站进行蛋白互作网络分析。构建稳定敲低E2F2的骨髓瘤细胞系MM.1S，并经蛋白印迹法（Western Blot）和荧光定量PCR（qRT-PCR）检测E2F2的表达水平。通过细胞粘附实验检测稳定敲低E2F2对骨髓瘤细胞粘附的影响，利用qRT-PCR检测稳定敲低E2F2后细胞粘附相关基因的表达变化。通过细胞迁移实验检测稳定敲低E2F2对骨髓瘤细胞迁移的影响。结果我们在骨髓瘤患者的临床样本中观察到E2F2的表达显著升高，GEO数据库结果显示E2F2在骨髓瘤中高表达提示患者预后不良。分析RNA-Seq数据获得815个共同差异基因，其中508个基因上调表达，307个基因下调表达，这些差异基因与细胞粘附和血管生成等功能密切相关。经Western Blot和qRT-PCR验证，成功构建稳定敲低E2F2的MM.1S细胞系。敲低E2F2显著增加 MM.1S细胞的粘附水平和升高FN1、PECAM1、ICOSLG等细胞粘附相关基因的表达，同时减弱MM.1S细胞迁移侵袭的能力，P值均 < 0.05。结论通过对RNA-seq数据的生物信息学分析，我们发现转录因子E2F2与骨髓瘤的细胞粘附密切相关，在骨髓瘤MM.1S细胞系中敲低E2F2能促进细胞粘附相关基因的表达和增加细胞粘附水平，并抑制细胞迁移能力。  
        关键词：多发性骨髓瘤;E2F2;细胞粘附   
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        发布时间：2024-02-19
      • 李琴,申云琴,郭兴悦,徐艺璇,李灵杰,武音帆,杨燕,陈彦球
        2022, 43(3): 373-380. DOI: 10.13471/j.cnki.j.sun.yat-sen.univ(med.sci).2022.0305
        摘要：目的探讨膳食添加菊苣酸对过敏性哮喘小鼠的体内调节作用。方法将16只5周龄雌性 BALB/c 小鼠随机分为4组：正常组（Control）、过敏性哮喘模型组（OVA）、膳食菊苣酸干预组（OVA+CA）和药物对照组（OVA+DEX）。使用卵清蛋白诱导过敏性哮喘小鼠模型，并全程饲喂含有400 mg/kg菊苣酸的饲料或不含菊苣酸的普通饲料。观察并记录小鼠体质量变化和鼻部症状，小鼠牺牲后检测肺组织病理学变化、外周血炎症细胞数量和比例，检测肺组织辅助性T细胞（Th）和细胞毒性T细胞（Tc）各亚型百分比。结果与过敏性哮喘模型组相比，膳食菊苣酸干预组的体质量减轻现象和挠鼻症状明显改善（P<0.05），外周血嗜酸性粒细胞数量、嗜酸性粒细胞/淋巴细胞比值显著下降（P<0.05），肺部炎症浸润情况以及杯状细胞增生情况缓解（P<0.05），肺组织Th2、Th17、Tc2、Tc17百分比降低（P<0.001），Th1和Tc1百分比则没有变化（P>0.05）。结论膳食补充菊苣酸能有效改善过敏性哮喘小鼠体内炎症。  
        关键词：菊苣酸;过敏性哮喘;炎症;嗜酸性粒细胞;T细胞   
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        发布时间：2024-02-19
      • 张译尹,吴娜,李雪莉,胡斌,吴欣仪,朱永红
        2022, 43(3): 381-391. DOI: 10.13471/j.cnki.j.sun.yat-sen.univ(med.sci).2022.0306
        摘要：目的探究环状RNA hsa_circ_0002316（circOMA1）是否参与泌乳素瘤耐药调控及其作用机制是什么。方法通过RT-qPCR检测临床泌乳素瘤标本中circOMA1表达情况（5例敏感泌乳素瘤标本和12例耐药泌乳素瘤标本）。通过慢病毒载体构建稳定表达外源性circOMA1 MMQ细胞系模型进行体外实验，分为MMQ NC组及MMQ OMA1组。通过构建裸鼠皮下肿瘤模型进行体内实验，分为MMQ NC+卡麦角林（CAB）组、MMQ NC+溴隐亭（BRC）组、MMQ OMA1+CAB组、MMQ OMA1+BRC组。通过CCK8、Western blot、ELISA等表型实验检测circOMA1对耐药机制中的细胞增殖和泌乳素（PRL）分泌两个方面的影响。通过Western blot、ELISA、免疫组化等实验检测circOMA1对多巴胺受体表达的影响。通过TargetScan、CircInteractome等软件分析预测、 microRNA-145-5p（miR-145-5p） minic补救实验探究circOMA1调控多巴胺受体机制。结果RT-qPCR结果显示多巴胺受体激动剂（DAs）耐药泌乳素瘤中circOMA1表达升高（P＜0.01）。在细胞实验及裸鼠皮下肿瘤实验中，与MMQ NC组相比，MMQ OMA1组DAs敏感性降低，细胞增殖水平和泌乳素分泌水平升高（P＜0.05）。Western blot和免疫组化结果显示，MMQ OMA1组多巴胺2型受体（DRD2）表达下调，多巴胺5型受体（DRD5）表达上调，环3’，5’-单磷酸腺苷（cAMP）水平上调（P＜0.05）。此外，在MMQ OMA1组中miR-145-5p表达下调，kelch重复序列和BTB结构域蛋白7（KBTBD7）mRNA及蛋白表达水平上调（P＜0.05），然而MMQ OMA1组转染miR-145-5p minic后，KBTBD7表达下调，DRD2表达上调（P＜0.05），表明过表达miR-145-5p逆转了circOMA1对KBTBD7的促进作用。结论circOMA1通过miR-145-5p/KBTBD7轴下调DRD2表达，降低泌乳素瘤对DAs敏感性，并且调控多巴胺受体表达激活cAMP通路促进泌乳素合成释放，从而促进泌乳素瘤耐药性。  
        关键词：circOMA1;泌乳素瘤;耐药;miR-145-5p   
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        发布时间：2024-02-19
      • 黄颖,谢杰,郑诗瑶,唐佳,郭奕斌
        2022, 43(3): 392-399. DOI: 10.13471/j.cnki.j.sun.yat-sen.univ(med.sci).2022.0307
        摘要：目的揭示一罕见遗传性矮小症家系的分子发病机制，阐明患者表型和基因型的相关性，为今后的产前、植入前基因诊断奠定基础。方法在临床初诊、系谱分析的基础上，首先采用高通量测序技术对先证者及其家庭核心成员的DNA样品进行全外显子组测序。通过生信分析找出候选基因，在确定候选基因及其新变异后，采用PCR、Sanger测序、RT-PCR、q-PCR等方法对该新变异的致病性进行系列鉴定。结果通过全外测序、Sanger测序验证和生物信息分析，确定TRAPPC2基因及其携带的 c.94 del G突变为本病最可能的致病基因突变；通过RT-PCR，排除了IVS as（-1） del G的可能；通过q-PCR检测，证实该突变导致患者和携带者的TRAPPC2基因表达量显著低于正常人群（P<0.01），且蛋白高级结构预测分析显示正常蛋白和突变蛋白的空间结构存在明显差异。根据ACMG的标准，确定为致病性突变。结论先证者所患疾病为XR型迟发性脊椎骨骺发育不良（SEDT），TRAPPC2基因的c.94 del G， p.D32T， fsX6是一还未报道的新致病突变，是患者发病的内在原因，其基因型和表型有显著的相关性。该研究进一步丰富了TRAPPC2基因的突变谱，为今后的早期诊防和优生优育打下了良好基础。  
        关键词：迟发性脊椎骨骺发育不良（SEDT）;TRAPPC2基因;新突变;鉴定   
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        发布时间：2024-02-19
      • 陈宇涛,杨洋,夏淦,许淼泓,曹霁昭,卢嘉茵,邹焱,杨霞
        2022, 43(3): 400-411. DOI: 10.13471/j.cnki.j.sun.yat-sen.univ(med.sci).2022.0308
        摘要：目的探究脂代谢相关基因ABHD5在肿瘤中的表达水平及其与临床分期、预后、免疫浸润的关系。方法在本研究中，使用GTEx、TCGA、TIMER2.0、CPTAC数据库及免疫组织化学法、免疫印迹法探究ABHD5在泛癌中的表达模式及其与不同临床分期的相关性，使用Kaplan-Meier Plotter、Oncolnc、R2数据库探究ABHD5与预后的相关性，并使用TCGA、TIMER2.0数据库探究ABHD5与免疫细胞浸润之间的相关性，再用STRING、GEPIA数据库获取肿瘤中与ABHD5结合或共表达的基因，进行GO和KEGG富集分析。结果与正常组织相比，ABHD5在多种肿瘤中mRNA和蛋白表达水平下调，在少数肿瘤中升高。ABHD5高表达在8种肿瘤中与较好的预后相关，在2种肿瘤中与较差的预后相关，在9种肿瘤中与免疫细胞浸润水平呈正相关关系，并在泛癌中与中性粒细胞浸润及免疫检查点基因的表达具有显著正相关性。富集分析显示ABHD5与组蛋白去甲基化过程密切相关。结论ABHD5与中性粒细胞浸润、免疫检查点基因表达及组蛋白去甲基化过程相关，且与多种肿瘤的预后相关。  
        关键词：ABHD5;泛癌;表达差异;中性粒细胞浸润;免疫检查点;组蛋白去甲基化   
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        发布时间：2024-02-19
      • 罗宇翀,韦淳仁,陈晓,李沫演,温盛霖
        2022, 43(3): 412-421. DOI: 10.13471/j.cnki.j.sun.yat-sen.univ(med.sci).2022.0309
        摘要：目的为了获得造模时间更短且症状维持时间更长的慢性强迫症小鼠模型，我们尝试对已有的喹吡罗诱导的慢性强迫症小鼠模型的造模方式进行优化。方法将22只小鼠随机分成实验组（n=11）和对照组（n=11），分别在其颈后皮下注射0.75 mg/kg的喹吡罗溶液或等量的生理盐水后放入强迫行为训练装置中训练，连续重复19 d，并记录两组小鼠训练期间的饮水行为及饮水量，评估喹吡罗对小鼠行为的影响。训练结束后通过进行旷场实验、高架十字迷宫实验、新物体识别等行为学实验，评估小鼠的焦虑状态和认知能力。此外对训练后小鼠进行免疫荧光实验，探究引起小鼠行为改变的神经机制。结果连续19 d喹吡罗注射结合行为训练能够有效地诱导小鼠表现不伴有焦虑和认知功能下降的类强迫检查行为（P<0.001），该强迫检查行为在训练结束后能够维持28 d以上。该模型小鼠的皮层-纹状体-丘脑-皮层环路上的多个脑区存在激活的现象（P<0.000 1）。结论慢性喹吡罗给药并结合强迫行为训练，能有效构建出表型明显且稳定的强迫症小鼠模型，并有效缩短造模所需时长。  
        关键词：喹吡罗;强迫症;强迫症模型;小鼠   
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        发布时间：2024-02-19
      • 苏嘉茵,吴忠道,罗学群
        2022, 43(3): 422-429. DOI: 10.13471/j.cnki.j.sun.yat-sen.univ(med.sci).2022.0310
        摘要：目的本研究旨在探索三氧化二砷（ATO）对急性T淋巴细胞白血病（T-ALL）细胞中DNA转甲基酶1（DNMT1）表达的影响及其抗白血病作用机制。方法体外培养T-ALL细胞株（Jurkat、CCRF-CEM、Molt-4），依据不同ATO干预浓度，分为对照组（0 μmol/L）、低浓度组（3 μmol/L）、高浓度组（6 μmol/L），应用RT-qPCR和western blot研究 ATO（0、3、6 μmol/L）干预24 h后细胞内DNMT1和cleaved-caspase-3表达的变化；应用流式细胞术测定 T-ALL 细胞系（Jurkat、CCRF-CEM、MOLT-4）的细胞死亡率；在ATO的干预下，应用Z-DEVD-FMK后检测DNMT1和cleaved-caspase-3表达和细胞死亡率的变化；在ATO的干预下，过表达DNMT1检测T-ALL细胞死亡率的变化。结果随着ATO浓度的增加，T-ALL细胞DNMT1表达水平降低，cleaved-caspase-3蛋白表达水平增加，细胞死亡率增加，差异具有统计学意义（P<0.05）；应用Z-DEVD-FMK后可特异性抑制cleaved-caspase-3，减弱ATO对DNMT1表达的抑制作用，降低细胞死亡率，差异具有统计学意义（P<0.05）；在T-ALL细胞中过表达DNMT1可显著降低ATO处理后诱导的细胞死亡，差异具有统计学意义（P<0.05）。结论在一定浓度范围内，ATO可通过激活caspase-3有效抑制DNMT1的表达从而诱导T-ALL细胞死亡，为未来ATO作为去甲基化药物应用于提高T-ALL的临床治疗提供了一定的理论依据。  
        关键词：急性白血病;细胞死亡;三氧化二砷;DNA转甲基酶1   
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        发布时间：2024-02-19
      • 李宛如,陈光锋,杨婷,胡司琦,杨远,马晓莉,张勇
        2022, 43(3): 430-436. DOI: 10.13471/j.cnki.j.sun.yat-sen.univ(med.sci).2022.0311
        摘要：目的制备68Ga标记的磁性锰铁氧纳米颗粒PET/MRI双模态显像探针，考察其作为前列腺癌显像新型分子探针的可能。方法以超顺磁锰铁氧纳米粒子为核心，利用成纤维激活蛋白抑制剂和羟基琥珀酰亚胺-四氮杂环十二烷四乙酸（DOTA）修饰，螯合正电子放射性核素68Ga，制备出纳米探针68Ga-DOTA-UMFNPs-FAPI-04。对纳米探针进行基本表征，分析其细胞毒性、放射化学纯度和稳定性。观察纳米探针在正常小鼠的体内分布和对荷瘤鼠的MRI显像效果。结果经纯化后，68Ga-DOTA-UMFNPs-FAPI-04放化纯为94%，稳定性良好。MRI T2测试显示其T2弛豫率约为39.02 mmol-1·s-1。正常鼠体内分布显示，68Ga-DOTA-UMFNPs-FAPI-04在肝脏、脾脏的放射性摄取较高。MRI显像显示，荷瘤鼠经尾静脉注射纳米探针后30 min，肿瘤部位可观察到摄取。结论成功构建PET/MRI双模态显像探针68Ga-DOTA-UMFNPs-FAPI-04，具有MRI T2造影剂特性，对小鼠前列腺肿瘤MRI显像良好，具备PET显像潜力。该研究为构建前列腺癌多模态成像探针提供了一个新的思路。  
        关键词：PET/MRI双模态成像;磁性纳米颗粒;成纤维激活蛋白抑制剂   
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      • 彭妙官,赖英荣
        2022, 43(3): 437-448. DOI: 10.13471/j.cnki.j.sun.yat-sen.univ(med.sci).2022.0312
        摘要：目的探讨tRNA衍生片段（tRFs）3'tiR_026_GlnCTG （n）在甲状腺乳头状癌（PTC）中的表达及其致癌机制。方法首先取2对PTC和邻近正常甲状腺组织用于高通量芯片检测，筛选差异tRFs。在芯片结果基础上，我们在10对PTC和邻近正常甲状腺组织中验证了差异明显的tRNA衍生片段的表达。接着扩大样本量，继续收集共46例患者的PTC和邻近正常甲状腺组织，通过定量聚合酶链反应（qPCR）验证3'tiR_026_GlnCTG （n）的表达量。将3'tiR_026_GlnCTG （n）的mimic转染到PTC细胞系中，通过定量反转录聚合酶链反应（qRT-PCR）检测表达水平，证实成功转染。同时，裂解转染的细胞系，提取蛋白，用包括MEK/ERK/p90RSK信号通路在内的相关抗体进行孵育，并进行蛋白免疫印迹（WB）。结果3'tiR_026_GlnCTG （n）是PTC组织与相邻正常甲状腺组织中表达水平差异最显著的tRFs之一（P＜0.05）。过表达3'tiR_026_GlnCTG （n）促进KTC1细胞及BCPAP细胞的迁移、侵袭和增殖能力，用MEK/ERK通路抑制剂处理后降低KTC1细胞及BCPAP细胞迁移、侵袭和增殖能力。在3'tiR_026_GlnCTG （n）过表达的细胞中，MEK、ERK及其下游靶点p90RSK的磷酸化水平显著升高。结论3'tiR_026_GlnCTG （n）可能通过激活MEK/ERK/p90RSK通路参与PTC的发生、发展。这将对PTC的发病机制提供新的认识，并为其治疗策略提供新思路。  
        关键词：甲状腺乳头状癌;tRNA衍生片段;致癌   
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        发布时间：2024-02-19

        临床研究

      • 薛瑞峰,赵崇希,王培宗,陈东泰,陈晓辉,曾维安,李强
        2022, 43(3): 449-461. DOI: 10.13471/j.cnki.j.sun.yat-sen.univ(med.sci).2022.0313
        摘要：目的既往有研究表明，输注较长时间储存的红细胞可能使疾病的预后变差，尤其是创伤、重症和接受心脏手术的病人。为了探讨在肿瘤病人当中，输注红细胞的储存时间对肿瘤病人的远期预后是否有影响，本回顾性研究分析了术中输注红细胞对肝细胞癌切除术后病人的复发及总生存率的影响。方法本研究收集了2008年8月1日至2012年6月30日于中山大学肿瘤防治中心（中国，广州）接受肝细胞癌切除术的病人1221例，分为输血组与未输血组，其中输血组根据输注红细胞的储存时间进一步分为新鲜红细胞组（储存时间≤14 d）和陈旧红细胞组（储存时间＞14 d）。对患者的总生存时间，肝内无复发生存时间，肝外无转移生存时间进行了分析，并采用多因素分析对不同储存时间的红细胞与肿瘤预后进行相关性分析。结果术中输注红细胞的病人共251例（20.6%），除14例患者新旧红细胞均有输注外，新鲜红细胞组112例，陈旧红细胞组125例。Kaplan–Meier生存分析显示输血组的总生存时间，肝内无复发生存时间，肝外无转移生存时间都更差（P<0.001），Cox多因素回归分析进一步提示输注陈旧红细胞是总生存时间（HR=1.417， P=0.049）和肝内无复发生存时间（HR=1.519， P=0.013）的独立影响因素，新鲜红细胞却不是。结论在接受肝细胞癌切除术的病人中，术中输注储存时间超过14 d的库存红细胞会增加术后肝内复发的风险且会缩短总生存时间，是一个影响预后的独立危险因素。  
        关键词：肝细胞肝癌;术中输血;新鲜红细胞;陈旧红细胞;远期预后   
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        发布时间：2024-02-19
      • 李昊天,吕磊,杨淞然,华平
        2022, 43(3): 462-470. DOI: 10.13471/j.cnki.j.sun.yat-sen.univ(med.sci).2022.0314
        摘要：目的基于计算流体力学技术，及血流动力学指标评价主动脉瓣狭窄对升主动脉瘤流场特征的影响。方法回顾性分析2017年1月至2021年12月中山大学孙逸仙纪念医院63名升主动脉扩张或升主动脉瘤的入院患者，根据瓣口面积分为主动脉瓣狭窄组及非狭窄组，对两组患者进行倾向性匹配分析后，比较两组的血流动力学指标（如：压力、剪切应变率 （SSR）、壁面剪切力 （WSS）、时间均化剪切应变率 （TASSR）和时间均化壁面剪切力 （TAWSS））；并根据中心线划分升主动脉为6块具有独特空间特征的区域，比较两组6块区域之间血流动力学指标的差异。结果主动脉瓣狭窄组升主动脉的SSR（191.70 ［117.22~248.78］ s-1）和WSS（2.87 ［1.88~4.00］ Pa）与非狭窄组的SSR（93.23 ［68.59~145.35］ s-1）和WSS（1.20 ［1.04~2.18］ Pa）相比，差异具有统计学意义 （SSR： Z = 2.167， P = 0.030； WSS： Z = 2.233， P = 0.026），且差异主要表现在升主动脉近端及小弯侧 （P <0.05）。而压力、TASSR或TAWSS的差异无统计学意义。结论主动脉瓣狭窄改变了升主动脉扩张或升主动脉瘤的血流动力学，增大了正切于血管的力（如：SSR、WSS），而对垂直于血管的力（如：压力）无明显的影响。  
        关键词：主动脉瓣狭窄;升主动脉瘤;流体力学;血流动力学指标;倾向性评分匹配   
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        发布时间：2024-02-19
      • 蔡春芳,古家美,官燕飞
        2022, 43(3): 471-479. DOI: 10.13471/j.cnki.j.sun.yat-sen.univ(med.sci).2022.0315
        摘要：目的探讨外周血循环肿瘤细胞（CTC）和三种肿瘤标志物检测对Ⅰ期子宫内膜癌（EC）的诊断价值，为寻找一种无创的早期EC诊断方法提供科学依据。方法选取2016年5月至2021年11月期间，335例健康女性体检者（对照组）、291例子宫内膜良性病变患者（良性病变组）、268例Ⅰ期EC患者（EC组）为研究对象，抽取体检者，患者的术前静脉血液标本3.2 mL，采用免疫荧光杂交和染色技术测定CTC水平，乳胶增强免疫比浊法测定SAA水平，电化学发光法测定HE4、CA125水平，观察3组研究对象的CTC、SAA、HE4、CA125阳性率及水平差异，比较CTC、SAA、HE4、CA125、（SAA+HE4+CA125）、（CTC+SAA+HE4+CA125）检测对Ⅰ期EC诊断的灵敏度、特异度、符合率、阳性预测值、阴性预测值、约登指数和受试者工作特征（ROC）曲线面积（AUC）的差异。结果①CTC、SAA、HE4、CA125、（SAA+ HE4+CA125）、（CTC+ SAA+ HE4+CA125）检测在EC组的阳性率均高于对照组和良性病变组，差异均具有统计学意义（P<0.01）。在良性病变组中，（CTC+HE4+SAA+CA125）检测的阳性率高于其他检测指标，与HE4、CTC检测比较，差异具有统计学意义（χ2=8.58，P=0.003；χ2=33.26，P<0.001）。在EC组中，（CTC+ HE4+SAA+CA125）检测的阳性率高于其他检测指标，与CTC、SAA、HE4、CA125、（SAA+HE4+CA125）检测比较，差异具有统计学意义（P<0.001）。②EC组的CTC、SAA、HE4、CA125表达水平最高，与对照组、良性病变组比较，差异具有统计学意义（P<0.001）。③（CTC+SAA+HE4+CA125）检测诊断Ⅰ期EC的灵敏度和符合率度最高，阴性预测值和约登指数最大。④CTC、SAA、HE4、CA125、（SAA+HE4+CA125）、（CTC+SAA+HE4+CA125）检测的AUC分别为0.86、0.81、0.75、0.78、0.82、0.95。结论（CTC+SAA+HE4+CA125）检测对诊断Ⅰ期EC具有较高的灵敏度、符合率、阴性预测值、约登指数，较大的AUC，是一种诊断早期EC的较佳组合模式。  
        关键词：循环肿瘤细胞;血清淀粉样蛋白A;人附睾蛋白4;糖类抗原125;子宫内膜癌   
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        发布时间：2024-02-19
      • 冼博鸿,位俊敏,乔贵宾,陈晓辉,徐方平,骆新兰,陈翼翔,李子俊
        2022, 43(3): 480-487. DOI: 10.13471/j.cnki.j.sun.yat-sen.univ(med.sci).2022.0316
        摘要：目的分析食管鳞癌患者（ESCC组）与健康对照组（HC组）肿瘤组织菌群多样性，筛选出食管鳞癌患者肿瘤组织中特异性细菌。方法收集105例食管鳞癌患者肿瘤组织标本和54例健康对照者的食管组织标本，提取标本总DNA，用PCR方法扩增16S rDNA V4区，后行高通量测序，将数据做OTU聚类及多样性分析筛选食管鳞癌组织内特征菌。最后用定量PCR（Q-PCR）扩增方法验证筛选结果。结果多样性分析表明ESCC组肿瘤标本和HC组正常食管组织标本内菌群多样性及组成存在明显差异，物种分析表明ESCC组以梭杆菌属（Fusobacterium）、孪生球菌属（Gemella）、奈瑟菌属（Neisseria）、卟啉单胞菌属（Porphyromonas）、链球菌属（Streptococcus）为主，HC组以梭杆菌属（Fusobacterium）、放线杆菌属（Actinobacillus）、链球菌属（Streptococcus）、普雷沃氏菌属（Prevotella）为主，LEfSe分析表明ESCC组卟啉菌属、梭杆菌属丰度升高，且具有统计学差异（P<0.05）。Q-PCR验证结果表明食管鳞癌组织内牙龈卟啉单胞菌、具核梭杆菌拷贝数明显升高。结论食管癌肿瘤组织有其特征性的菌群组成，与健康对照组相比，食管鳞癌肿瘤组织中牙龈卟啉单胞菌、具核梭杆菌拷贝数明显升高，可能是其特征性的细菌。  
        关键词：食管鳞状细胞癌;细菌;卟啉单胞菌属;梭杆菌属   
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        发布时间：2024-02-19
      • 刘佩佳,方佳,李少敏,汤磊乐,刘迅
        2022, 43(3): 488-495. DOI: 10.13471/j.cnki.j.sun.yat-sen.univ(med.sci).2022.0317
        摘要：目的探讨代谢综合征（MetS）及其组成因素与估算肾小球滤过率（eGFR）快速下降的关系。方法中国健康和养老追踪调查是一个全国范围的具有代表性的纵向研究，其主要研究中老年家户身心健康和社会活动状况。队列数据可以在中国健康和养老追踪调查官网申请后免费获取。我们选取2011年的基线数据和2015年的随访数据。本研究纳入年龄大于等于45岁eGFR≥60 mL·min-1·（1.73m2）-1的人群，且既往无恶性肿瘤、心脏病、中风、肾病，排除数据有缺失值、异常值人群，最终纳入4 400个参与者。eGFR快速下降定义为平均每年eGFR下降>3 mL·min-1·（1.73m2）-1。根据eGFR是否快速下降，将参与者分成eGFR快速下降组（770人）和eGFR非快速下降组（3 630人）。通过logistic回归检验MetS与eGFR快速下降关系，并进一步探索MetS各组成成分和eGFR快速下降的关系。结果和非MetS人群相比，MetS人群校正混杂因素后，MetS与eGFR快速下降的发生无关（P>0.05），MetS发生eGFR快速下降优势比（OR）为0.988，95%置信区间（CI）为0.811~1.204。在校正混杂因素后，MetS各组成成分eGFR快速下降的风险分别是：中心型肥胖OR 95%CI值为0.968（0.778， 1.204）， P=0.767；血糖升高OR 95%CI值为0.840（0.715， 0.986）， P=0.032；血压升高OR 95%CI值为1.087（0.919， 1.285）， P=0.328；高密度脂蛋白胆固醇降低OR 95%CI值为1.085（0.895， 1.316）， P=0.404；甘油三脂升高OR95%CI值为1.110（0.918， 1.343）， P=0.281。结论在中老年人群中，MetS不是eGFR快速下降独立危险因素，而血糖升高和降低与eGFR快速下降风险相关。血糖升高造成假象性的肾脏获益可能跟其疾病早期造成的肾脏高灌注和高滤过有关。我们需要更长时间的随访，进一步观察MetS及其组成因素对肾脏功能的动态影响。  
        关键词：代谢综合征;肾小球滤过率;慢性肾脏病;中国健康和养老追踪调查   
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        发布时间：2024-02-19
      • 牛姗姗,钟利平,宋腾飞,秦培鑫,陈玲美,张亚琴
        2022, 43(3): 496-503. DOI: 10.13471/j.cnki.j.sun.yat-sen.univ(med.sci).2022.0318
        摘要：目的探讨自发性脑出血（ICH）患者CT平扫“低密度征”和CT血管造影（CTA）“斑点征”在预测急性期血肿扩大的应用价值。方法回顾性分析急性自发性脑出血患者232例，在232例急性ICH患者中，根据血肿体积是否扩大，分为血肿扩大组（62例），血肿无扩大组（170例）。发病24 h内行基线CT平扫和CTA扫描，并进行CT复查。分析所有患者临床资料及影像学资料，测量血肿体积并判断血肿体积是否扩大，通过单因素方差分析、二元Logistic回归分析及ROC曲线比较CT“低密度征”和CTA“斑点征”在预测血肿扩大的应用价值。结果单因素分析得到入院时GCS评分、首次CT检查时间、“斑点征”、“低密度征”在两组间差异有统计学意义（P值分别为0.003，0.012，＜0.001，0.001）；二元Logistic回归分析得到首次CT检查时间、“斑点征”及“低密度征”在两组间差异有统计学意义（P＜0.05）；“斑点征”“低密度征”“斑点征联合低密度征”的ROC曲线下面积分别为0.669，0.606，0.726，“斑点征”“低密度征”“斑点征联合低密度征”预测血肿扩大的敏感性、特异性分别是41.9%和91.8%、93.5%和27.6%、95.2%和27.6%。结论“斑点征”和“低密度征”都是预测急性期自发性脑出血患者血肿扩大的独立危险因素，“斑点征”的特异性高，“低密度征”的敏感性高，“斑点征联合低密度征”预测血肿扩大的敏感性优于单一征象。  
        关键词：自发性脑出血;血肿扩大;低密度征;斑点征   
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        发布时间：2024-02-19

        综述

      • 关苑君,马显才
        2022, 43(3): 504-510. DOI: 10.13471/j.cnki.j.sun.yat-sen.univ(med.sci).2022.0319
        摘要：近十年来，科学家们发现液-液相分离在许多生理过程中扮演重要角色，发挥着许多生物学功能。一旦发生异常，将会导致多种疾病产生。在生物学研究中，光学显微成像技术是液-液相分离主要的研究工具之一。本文阐述了几个重要的光学显微成像技术在液-液相分离的研究中的应用和对比，以观察相分离的存在和形成等过程。详细地阐述了运用共聚焦显微技术中的荧光漂白后恢复技术（FRAP）检测其扩散和物质交换的特性，并总结了应用该技术时的成像条件、注意事项和参数应用，为科学研究者提供技术选择的依据。  
        关键词：液-液相分离;光学显微技术;共聚焦显微技术;荧光漂白后恢复;超分辨   
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        发布时间：2024-02-19
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